血清是一種成分復(fù)雜的混合物,且對(duì)細(xì)胞成長(zhǎng)具有促進(jìn)作用,我們培育細(xì)胞離不開血清。那在大規(guī)模細(xì)胞培育中由血清引起的細(xì)胞成長(zhǎng)狀況不佳及病毒滴度的影響都有哪些體現(xiàn)?
一、細(xì)胞成長(zhǎng)速度緩慢,長(zhǎng)滿單層時(shí)刻長(zhǎng);從同一細(xì)胞瓶中分出兩瓶細(xì)胞,用同一種培育液,別離加入10%的對(duì)照血清和待檢血清,在相同條件下培育72小時(shí),會(huì)呈現(xiàn)對(duì)照血清長(zhǎng)滿單層,而待檢血清大約只有60~70%,這種血清就不合適用來(lái)大規(guī)模培育細(xì)胞。
二、細(xì)胞傳代后形狀不正常,細(xì)胞狀況發(fā)生變化 ;因?yàn)檠宓馁|(zhì)量問(wèn)題,使本來(lái)狀況正常的細(xì)胞經(jīng)傳代后形狀會(huì)變差;
比方:細(xì)胞瓶里會(huì)呈現(xiàn)一些活動(dòng)的小黑點(diǎn)(并非污染),或許細(xì)胞表面形成一層油狀掩蓋物;細(xì)胞的概括變得模糊,細(xì)胞之間的空隙被血清中的蛋白顆粒填充,從而影響細(xì)胞向四周擴(kuò)展成長(zhǎng)。
三、細(xì)胞傳幾代后就呈現(xiàn)脫壁現(xiàn)象,不能連續(xù)傳代 ;質(zhì)量較差的血清缺乏某種細(xì)胞的貼壁因子,會(huì)使細(xì)胞在傳代過(guò)程中逐漸喪失貼壁的才能。細(xì)胞會(huì)從正常的貼壁狀況,邊緣開端縮小,上翹。觀察到的現(xiàn)象便是細(xì)胞表面不光滑,晃動(dòng)細(xì)胞瓶會(huì)看到細(xì)胞表面有絮狀物隨培育液動(dòng)搖。跟著傳代次數(shù)添加,細(xì)胞縮小的狀況越來(lái)越嚴(yán)峻,直到終*脫壁而死亡。
四、細(xì)胞長(zhǎng)的很好,細(xì)密的單層,狀況也很正常,但是接毒后細(xì)胞基本不發(fā)生病變,做滴度檢測(cè)簡(jiǎn)直測(cè)不出抗原滴度。這種狀況也許是因?yàn)?血清中含有與接種的病毒有同源的特異性抗體。
五、細(xì)胞成長(zhǎng)的狀況一般,產(chǎn)毒少,毒價(jià)低。這種狀況比較常見,細(xì)胞是病毒的載體,因?yàn)檠遒|(zhì)量欠好,導(dǎo)致細(xì)胞成長(zhǎng)狀況欠好,病毒就無(wú)法進(jìn)行正常的仿制。并非病毒都不能仿制,所以就形成疫苗的效價(jià)不行,可能形成不合格產(chǎn)品。
比方血清中經(jīng)常會(huì)存在乙腦抗體,牛腹瀉病毒抗體等,如果存在這些抗體,就會(huì)把接進(jìn)去的病毒給中和掉。如果抗體滴度很高,病毒會(huì)被抗體*中和,就沒(méi)病毒顆粒在細(xì)胞中增殖,所以會(huì)檢測(cè)不到病毒滴度。
這種狀況給疫苗企業(yè)形成的損失是相當(dāng)大的,不產(chǎn)毒等于前面所做的那么多作業(yè)悉數(shù)白費(fèi),糟ta人力、物力,尤其是時(shí)刻上的糟ta,從培育細(xì)胞開端到接病毒,到收液至少需求一兩個(gè)月,一旦呈現(xiàn)不產(chǎn)毒的狀況,那么這一兩月時(shí)刻就白白糟ta掉了,這也是牛血清給疫苗企業(yè)形成的風(fēng)險(xiǎn)之一。
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